專業的組織研磨儀研_高通量組織研磨儀發生産商-上海淨信實業發展有限公司! 欧美AV | 欧美AV | 在線留言
欧美AV統一服務欧美AV
021-57790908
當前位置:欧美AV > 欧美AV中心 > 技術知識 >

全自動樣品冷凍研磨儀破碎大腸杆菌的細胞壁

文章出處:admin作者:上海淨信 人氣:发表时间:2019-01-02 13:38

實驗目的

對大腸杆菌進行破壁,提取其蛋白質。

實驗原理

通過研磨珠的撞擊,破碎大腸杆菌的細胞壁,使其內容物流出,進而提取其蛋白質。

實驗材料和器具

樣品:大腸杆菌

儀器:全自動樣品冷凍研磨儀(上海淨信,JXFSTPRP-96)

耗材:離心管,研磨珠(上海淨信,1號)

實驗步驟

1.IPTG诱导表达的大肠杆菌细胞经离心后弃沉淀,在加入2体积 PBS重悬细胞团块后,以移液枪将其加入含有1号玻璃研磨珠的离心管中;

2.將上述離心管放入多樣品組織研磨機中,在13單位振頻條件下震蕩90s;

3.取出离心管在4o c离心,保存上清液S1,以备上述检测;

4.向每个1号玻璃珠离心管中加入0.2ml 8M 尿素溶液后,再放入多樣品組織研磨機中,在13单位振频条件下震荡90s,可见混浊液变清;

5.離心後收集上清液S2與S1(各0.002ml)在SDS-Page上電泳檢測。

實驗結果

泳道实验

 

圖注:泳道3:marker

泳道2:0號對照

泳道1:含8M尿素上清

泳道0:bingding buffer 上清

泳道      0        1       2      3

本蛋白形成包涵體,在使用此研磨機後進行上樣電泳。圖譜清晰,說明本研磨機適用于含包涵體菌體的破碎。